类S1总科是一类包含与核糖体蛋白S1的RNA结合结构域相似的结构域的蛋白合集。
单增李斯特菌毒力基因主要集中在两个毒力岛IPI-1和LIP-2,其中李氏溶血素基因(hlyA)、磷脂酶C基因(plcB)属于LIP-l,内化素基因(inlA)属于LIP-2。根据公式(1)计算质粒DNA的瓶间不均匀性引起的不确定度(uh):所有公式中变量均改为斜体其中：Q1为组间差方和，Q2为组内差方和，v1为组间自由度，v2为组内自由度，n为组内测量次数。
hlyA基因编码的李斯特菌溶血素O(1isteriolysin,LLO)是单增李斯特菌最重要的一种毒力因子，是单增李斯特菌检测的关键性靶标，联合检测三种毒力基因将有助于了解李斯特菌的毒力状况，并进行相关分型。引物合成、DNA测序由华大基因科技股份有限公司提供。基因组DNA作为参考品，难以同时为多个靶标提供可溯源的定量参考。评估其在实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测中的适用性。本研究中，拟通过合成含有单增李斯特菌检测的hlyA、plcB、inlA基因的质粒作为荧光定量聚合酶链反应(qPCR)参考品，并就其均匀性、稳定性等性能进行评价，探讨其替代传统基因组参考品的可行性，以期这种可追溯的、有效的参考材料可以解决病原核酸检测能力快速发展与缺乏参考材料之间的矛盾。
质粒DNA的A260/A280在1.8～2.0之间，A260/A230大于2.0被认为纯度符合参考品要求。PCR方法原理是利用单增李斯特菌区别于李斯特菌属内其他细菌的多个靶基因选择特异性序列建立PCR以及实时荧光PCR。通过甲基纤维素在重组牛排中的应用试验,结果表明：随着甲基纤维素添加量的不断提高,重组牛排冻融损失和热加工损失均依次降低。
烤肠蒸煮损失CL=[(A-B)/A]100%(2)选取同样大小的牛排,热加工前称取重量计A,160℃油煎90s后,称取重量计为B,则牛排热加工损失=[(热加工的重量A-热加工后的重量B)/热加工前的重量A]100%牛排热加工损失CL=[(A-B)/A]100%(3)选取原料：牛外脊肉67.0kg、磷酸盐0.43kg、小苏打0.1kg、异抗坏血酸钠0.03kg、食盐0.5kg、牛肉精粉0.1kg、白砂糖0.27kg、酱油0.27kg、牛肉浸膏0.1kg、黑胡椒粉0.1kg、木薯变性淀粉1.1kg、冰水50.0kg。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。原因同样是由于甲基纤维素水合液具有一定的粘度,配置为注射料液时,注射液粘度过高,影响了肉块的吸收,从而影响了肉块腌制效果,多余的水分没有被盐溶性蛋白完全吸收。11、甲基纤维素对重组牛排口感的影响如图14所示,肉制品的质构性质一般也使用质构仪中的全质构分析进行测定。
随着甲基纤维素添加量的不断提高,重组牛排冻融损失和热加工损失均依次降低,当甲基纤维素添加量达到0.8%时,冻融损失率和热加工损失反而有所上升,这可能是由于甲基纤维素水合液具有一定的粘度,配置为注射料液时,注射液粘度过高,影响了肉块的吸收,从而影响了肉块腌制效果,多余的水分没有被盐溶性蛋白完全吸收,因此冻融损失和热加工损失不降反而升高了声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。
如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：甲基纤维素，异抗坏血酸钠，甲基纤维素，磷酸盐。通过测试重组牛排热加工后的硬度和弹性,我们发现甲基纤维素可以明显提升重组牛排热加工后的口感。当添加量为1.2%时,台烤肠的硬度达到了最大值1455.2g,比空白组提高了154.72%。当添加量为0.8%时,台烤肠弹性达到最大值为13.7,硬度为737.5g,分别比空白组提升了26.85%和28.68%。
通过甲基纤维素在重组牛排中的应用试验,结果表明：随着甲基纤维素添加量的不断提高,重组牛排冻融损失和热加工损失均依次降低。羟丙基淀粉和甲基纤维素协同性最好,其次是木薯淀粉。甲基纤维素A4C分别为0、0.35、0.6、1.0kg的方法制作的牛排各3块,分别称取其重量并计为N,在-18℃的冰箱中冷冻24h后,然后取出在室温下自然解冻,待牛排完全解冻后,去除析出的水分,然后用吸纸擦去牛排表面多余的水分,然后再分别称取此时牛排的重量,并计为M,各组3块牛排均取平均值。随着甲基纤维素添加量的不断提高,重组牛排冻融损失和热加工损失均依次降低,当甲基纤维素添加量达到0.8%时,冻融损失率和热加工损失反而有所上升,这可能是由于甲基纤维素水合液具有一定的粘度,配置为注射料液时,注射液粘度过高,影响了肉块的吸收,从而影响了肉块腌制效果,多余的水分没有被盐溶性蛋白完全吸收,因此冻融损失和热加工损失不降反而升高了。
相同型号的甲基纤维素浓度越高,析水率越高。烤肠蒸煮损失CL=[(A-B)/A]100%(2)选取同样大小的牛排,热加工前称取重量计A,160℃油煎90s后,称取重量计为B,则牛排热加工损失=[(热加工的重量A-热加工后的重量B)/热加工前的重量A]100%牛排热加工损失CL=[(A-B)/A]100%(3)选取原料：牛外脊肉67.0kg、磷酸盐0.43kg、小苏打0.1kg、异抗坏血酸钠0.03kg、食盐0.5kg、牛肉精粉0.1kg、白砂糖0.27kg、酱油0.27kg、牛肉浸膏0.1kg、黑胡椒粉0.1kg、木薯变性淀粉1.1kg、冰水50.0kg。
高温条件,台烤机160℃烤制30min后进行测试。当甲基纤维素添加量为0.5%时,冻融损失和热加工损失最低,分别达到了9.86%和3.75%,比空白组分别下降了2.52%和12.13%,牛排出品率提升了14.65%。
牛排硬度和弹性也达到了最高值,分别为615.4g和13.1,分别比空白组提升了13.42%和11.02%。随着甲基纤维素添加量的不断提高,重组牛排热加工后的硬度和弹性均有明显的提升,当甲基纤维素添加量达到0.5%时,牛排硬度和弹性达到了最高值,分别为615.4g和13.1,分别比空白组提升了13.42%和11.02%。转子,TA-P-KIT2刀片型探头。分析原因可能和甲基纤维素与各类淀粉的协同机理一样,其支链结构成分越复杂,含量越高,和甲基纤维素的结合就越好,反之亦然。通过甲基纤维素在台湾烤肠中的应用试验,结果表明：台湾烤肠中添加不同比例的甲基纤维素都会降低其热加工损失,并且热加工损失随着甲基纤维素添加量的不断增加而降低。样品处理和参数设定分别如下。
添加甲基纤维素后,冷却状态下测试台烤肠,烤肠硬度会随着甲基纤维素添加量的升高而不断提高,但是整体上升幅度不大,当添加量为1.2%时,台湾烤肠硬度为731.9g,比空白组提升了34.89%。样品处理：香肠采用整根测试,分别选取低温冷却状态下和高温烤制状态下同样规格的样品进行测试。
三、结论用单因素梯度试验分别测试不同粘度、不同浓度、加热温度对甲基纤维素凝胶强度的影响,以及肉制品中常用的辅料淀粉对甲基纤维素凝胶强度的影响。结果表明：随着浓度升高,甲基纤维素水合液粘度不断升高。
重组牛排采用整片测试,按照同样的热加工工艺,160℃油煎60s后,切取大小为3cm3cm的小块,用质构仪测定。在特定的加热条件下,相同浓度的甲基纤维素形成凝胶后,高粘度的A4M比低粘度的A4C析出水分更多,析水率更高。
11、甲基纤维素对重组牛排口感的影响如图14所示,肉制品的质构性质一般也使用质构仪中的全质构分析进行测定。热加工后的台烤肠的硬度和弹性基本都随着甲基纤维素添加量的增大而升高。原因同样是由于甲基纤维素水合液具有一定的粘度,配置为注射料液时,注射液粘度过高,影响了肉块的吸收,从而影响了肉块腌制效果,多余的水分没有被盐溶性蛋白完全吸收。当甲基纤维素添加量达到1.0%或者更高时,复合凝胶的凝胶强度随着甲基纤维素用量的增加而不断提高。
10、甲基纤维素对重组牛排冻融稳定性和热加工损失的影响如图13所示,选取部分烤肠,热加工前称取重量计A,按照相应的热加工工艺熟化后,称取重量计B,则烤肠蒸煮损失=[(热加工的重量A-热加工后的重量B)/热加工前的重量A]100%。随着甲基纤维素添加量的不断提高,当甲基纤维素添加量达到0.8%时,重组牛排弹性和硬度也有所下降。
通过甲基纤维素与肌纤维蛋白共混凝胶试验,结果表明：当甲基纤维素添加量为0.5%时,复合凝胶的凝胶强度不但没有提高,反而降低了。则：牛排冻融损失=[(N-M)/N]100%(4)通过测试重组牛排的冻融损失和热加工损失,我们发现甲基纤维素在重组牛排提高其冻融稳定性、减少热加工损失方面有明显的作用。
当甲基纤维素添加量为0.5%时,重组牛排冻融损失和热加工损失最低,分别达到了9.86%和3.75%,比空白组分别下降了2.52%和12.13%,牛排出品率随之提升了14.65%分析原因可能是,当体系以盐溶性蛋白为主时,甲基纤维素的加入反而影响了其凝胶网络结构,因此复合凝胶的凝胶强度反而下降了,当甲基纤维素添加量达到或超过1.0%时,凝胶强度随着甲基纤维素量的增加而不断升高,说明当甲基纤维素体系为主要成分时,它可以提高盐溶性蛋白的凝胶强度。
但是目前肉制品普遍使用的卡拉胶等增稠剂都是冷凝胶,在产品热加工过程中凝胶体系会被不同程度的破坏,从而影响产品的稳定性和持水性。6、甲基纤维素添加量对SSMP-MC复合凝胶强度的影响如图9所示,盐溶性蛋白体系添加不同比例的甲基纤维素后复合凝胶的凝胶强度有不同的变化。当添加量为1.0%或者更高时,台烤肠的硬度有所提升而弹性变化不大,原因有可能是当甲基纤维素过量添加时,其独特的热凝胶性质发挥到了最大限度,和盐溶性蛋白以及大豆蛋白等其它蛋白凝胶体系的协同性达到了最大值,因此当甲基纤维素的添加量过大时,台烤肠的硬度能够不断提升,而弹性变化不大。9、甲基纤维素添加量对台烤肠热加工后凝胶强度的影响如图12所示,通过测试煎烤后台烤香肠的凝胶强度,我们发现添加甲基纤维素后能显著提高台湾烤肠的凝胶强度。
冷却状态下台烤香肠的弹性没有明显的变化,变化曲线比较平缓,差异性不显著。当添加量为0.8%时,台烤肠弹性达到最大值,弹性为13.7,硬度为737.5g,分别比空白组提升了26.85%和28.68%。
当甲基纤维素添加量为0.5%时,复合凝胶的凝胶强度不但没有提高,反而降低了。一般将硬度定义为第一次压缩样品所需的最大的力,其值为第一次挤压过程中的峰值,是最直接反应口感的一个指标。
热加工损失也是肉制品厂家评判一种增稠剂或者稳定剂品质好坏的重要指标。我们在实际应用的时候也要考虑适当的添加量,添加量过高也可能会影响台烤肠的综合指标,选择合适的添加方式和添加量不仅能够使产品品质得到提升,同时也能够最大限度的降低产品成本,为工厂节约成本,达到资源的优化整合。